Полезные свойства дерева ивы
1 ГБОУ ВПО «Дальневосточный государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации
2 Пятигорский медико-фармацевтический институт — филиал ГБОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Более половины населения планеты страдает заболеваниями опорно-двигательного аппарата. Так как в терапии данного заболевания назначают нестероидные противовоспалительные средства (НПВС) наиболее частым осложнением является эрозивно-язвенные повреждения слизистой желудочно-кишечного тракта. В то же время известно о наличии лекарственных растений, обладающих противовоспалительным действием. Мировые тенденции свидетельствуют о росте их применения в терапии заболеваний суставов. Целью исследования является изучение противовоспалительного и ульцерогенного действия потенциально новых видов лекарственного растительного сырья — порошков из коры и побегов ивы вавилонской (Salix babylonica L.) и гибрида ивы вавилонской с ивой белой (Salix babylonica х alba (S.Salamonii Carriere)). В опытах на крысах на модели хронического пролиферативного воспаления (ватной гранулемы) измельченные порошки изучаемых объектов в эффективной дозе 68 мг/кг обладают достоверной антиэкссудативной активностью, при этом порошки коры и побегов ивы вавилонской оказались сопоставимы с лекарственным средством диклофенак. По ограничению пролиферации 3 исследуемых объекта (кора обоих видов ивы и побеги ивы вавилонской) достоверно угнетают образование грануляционной ткани по отношению к контрольной группе. При этом из исследуемых объектов максимальное воздействие оказала кора ивы вавилонской, не уступая по уменьшению образования грануляционной ткани препарату сравнения диклофенаку. Выявленные эффекты порошков коры и побегов ивы вавилонской и ее гибрида с ивой белой в определенной степени способствуют регенерации тканей в очаге воспаления. Ульцерогенная активность всех изученных объектов была достоверно ниже, чем у животных, получавших диклофенак. Следовательно, их длительное применение в терапии воспалительных заболеваний суставов более безопасно.
1. Государственный реестр лекарственных средств [Электронный ресурс].-Электрон. дан.-М., 2014.-Режим доступа: http://grls.rosminzdrav.ru/. (дата обращения: 11.08.15).
2. Компанцева, Е.В., Фролова, О.О., Савенко, И.А. Изучение противовоспалительной активности побегов ивы белой //Проблемы фармацевтической науки и практики: материалы IV Межрегион. науч.-практ. конф. с междунар. участием (Владикавказ, 30–31 мая 2014 г.).- Владикавказ, 2014.- С.206-209.
4. Прохоров, И.Е. Место и роль использования фитопрепаратов в терапии суставной формы ювенильного ревматоидного артрита //Архив клинической и экспериментальной медицины. – 2008. – Т.17, №1. – С.81-84.
5. Реестр продукции, прошедшей государственную регистрацию [Электронный ресурс].-Электрон. дан.-М., 2014.-Режим доступа: http://fp.crc.ru/gosregfr/ (дата обращения: 11.08.15).
6. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / под ред. Р.У. Хабриева.- М.: Медицина, 2005.-С.695-709.
7. Chrubasik S. Evidence of effectiveness of herbal anti-inflammatory drugs in the treatment of painful osteoarthritis and chronic low back pain // Phytother. Res. – 2007. – Vol. 21. – P.675-683.
8. Willow bark [monograph]: British Pharmacopoeia.- London, 2009.- Vol. III. Herbal Drugs and Herbal Drug Preparations-3p.
10. Willow bark Salix spp. Analytical, quality control and therapeutic monograph // American Herbal Pharmacopoeia and Therapeutic Compendium. — Santa Cruz, 1999.-16p.
Более половины населения планеты страдает заболеваниями опорно-двигательного аппарата. Так как в терапии данного заболевания назначают нестероидные противовоспалительные средства (НПВС) наиболее частым осложнением является эрозивно-язвенные повреждения слизистой желудочно-кишечного тракта. Известно, что из НПВС сильным ульцерогенным влиянием обладают кеторолак, пироксикам, лорноксикам, индометацин, бутадион, кислота ацетилсалициловая (аспириновые язвы желудка), а наиболее безопасными препаратами из этой группы считают ингибиторы ЦОГ-2, к которым относят ацеклофен, мелоксикам, нимесулид, набуметон, целекоксиб, хотя и они могут повреждать слизистую оболочку желудка. В то же время известно о наличии лекарственных растений, обладающих противовоспалительным действием. Мировые тенденции свидетельствуют о росте их применения в терапии заболеваний суставов. Чаще всего речь идет о сочетанном приеме, позволяющем существенно снизить дозу НПВС и предотвратить побочные эффекты гастротоксического действия [4, 7].
Одним из таких растений является ива, которая давно применяется в народной медицине как противовоспалительное и обезболивающее средство. В настоящее время кора ивы включена в Европейскую, Британскую и Американскую травяную фармакопеи, а также входит в состав официально зарегистрированных лекарственных средств и гомеопатических препаратов [8,9,10]. К числу фармакопейных согласно Европейской Фармакопее (ЕФ) относятся ивы с содержанием салицина более 1,5% (после щелочного гидролиза). В качестве сырья используется кора молодых ветвей или целые однолетние ветки диаметром не более 10 мм [9]. В Российской Федерации ива не является фармакопейным растением. На сегодняшний день у нас в стране зарегистрировано только одно ЛС, содержащее иву – «Инсти» (травяные гранулы, содержащие густой водный экстракт нескольких растений, основное из которых – кора ивы белой) производства Herbion Pakistan (Pvt) LTD (Пакистан) [1]. Кора ивы выпускается самостоятельно в виде биологически активных добавок (БАД) в г. Москве, г. Санкт-Петербурге, в Алтайском крае и входит в состав многих комплексных БАД [5]. Большие сырьевые запасы и возможность культивирования в различных регионах нашей страны дают предпосылки для включения разных видов ивы в Государственную Фармакопею.
Целью исследования является изучение противовоспалительного и ульцерогенного действия потенциально новых видов лекарственного растительного сырья – порошков из коры и побегов ивы вавилонской (Salix babylonica L.) и гибрида ивы вавилонской с ивой белой (Salix babylonica х alba (S.Salamonii Carriere)).
Методы исследования
Исследование проводили на образцах побегов и коры ивы вавилонской и ее гибрида с ивой белой, собранных в Ставропольском крае, в окрестностях г. Пятигорска (район поймы реки Подкумок) в июне, июле и сентябре 2013г. и 2014 гг. Сбор коры производили с 2-4 летних ветвей ивы методом кольцевого среза. Сбор побегов (однолетних ветвей длиной не более 30 см с листьями) проводился путем срезки с помощью ножа или секатора. Сырье было высушено в естественных условиях. Данные виды ивы были выбраны в связи с возможностью их успешного культивирования в южных регионах России, что позволит в перспективе выращивать и заготавливать сырье в промышленных масштабах без существенного ущерба для естественных пойменных ивняков.
Для проведения экспериментов готовили водные суспензии измельченных до мелкодисперсного состояния побегов и коры ивы вавилонской и ее гибрида с ивой белой. При выборе дозировки исходили из дозировки капсул «Кора ивы белой – White Willow Bark» («Sunrider Manufacturing, L.P.», США), содержащих 400 мг измельченного сырья. В аннотации к ним указана суточная доза 400-800 мг [5]. Исследуемые объекты вводились крысам в дозе 68 мг/кг, что соответствует приему человеком в сутки 800 мг порошка. Ранее было установлено, что именно эта дозировка является оптимальной [2]. Для перерасчета доз используемых препаратов на 1 кг массы тела животного разовую дозу в расчете на 1 кг массы тела человека увеличивали в 5,9 раз. Для устойчивости суспензии предварительно порошок растительного сырья (900 мг) растирали с 3 каплями Твина-80. Далее порциями воды очищенной кору и побеги ивы вавилонской и ее гибрида количественно переносили в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводили водой очищенной до метки. Крысе массой 200 г вводили 1,5 мл суспензии.
Препаратом сравнения служил диклофенак, который является одним из наиболее часто применяемых НПВС. На настоящий момент в Государственный реестр лекарственных средств включено 264 наименования ЛС, содержащих диклофенак [1]. Вещество вводилось крысам в дозе 8,5 мг/кг, что соответствует приему человеком терапевтической дозы – 100 мг в сутки, также в виде водной суспензии на Твине-80.
Для оценки противовоспалительной активности был выбран метод «ватной» гранулемы, который является одной из наиболее адекватных моделей хронического пролиферативного воспаления [9]. Исследование выполнено на 36 крысах-самках линии Wistar весом 200-220 г (на момент начала эксперимента). Во время эксперимента животные содержались в контролируемых условиях: температура окружающего воздуха 22±2˚С, относительная влажность 65±5%. Для размещения животных применялись макролоновые клетки Т-3 оборудованные стальными решетчатыми крышками, с кормовым углублением. В качестве подстилочного материала применялись древесные опилки нехвойных пород древесины. Животные содержались на стандартном пищевом рационе со свободным доступом к корму (Полнорационный комбикорм рецепт ПК-120 для содержания лабораторных животных, ГОСТ Р 50258-92, производитель ООО «Лабораторкорм») и воде. Вода водопроводная подавалась в стандартных питьевых бутылочках.
Методика заключалась в следующем: у белых крыс, находящихся под хлоралгидратным наркозом (доза 350 мг/кг), в области спины выстригалась шерсть. В асептических условиях ножницами делался разрез кожи и подкожной клетчатки длиной около 1 см, пинцетом в подкожной клетчатке через разрез формировалась полость, куда помещался простерилизованный ватный шарик массой 15 мг, после чего на рану накладывалось два шва. На восьмые сутки опыта имплантированный шарик с образовавшейся вокруг него грануляционной тканью извлекался, взвешивался, затем высушивался до постоянной массы при 60-65оС. О величине экссудативной фазы воспаления судили по разнице в массе (мг) шарика до и после высушивания, о величине пролиферативной фазы – по разнице в массе (мг) высушенного шарика с его исходной массой 15 мг [3].
Экссудацию рассчитывали по формуле (1):
m1 – масса ватного шарика сразу после извлечения из животного, г;
m2 – масса ватного шарика после высушивания, г.
Пролиферацию рассчитывали по формуле (2):
m2 – масса ватного шарика после высушивания, г.;
0,015 – исходная масса ватного шарика, г.
Изучаемые измельченные побеги и кору ивы вавилонской и гибрида, а также препарат сравнения в эквивалентном объеме воды вводили с помощью зонда в желудок в течение 7 дней. Контрольным животным таким же образом вводили физиологический раствор.
Для изучения ульцерогенного действия исследуемых объектов после удаления ватных гранулём испытуемых животных декапитировали под хлоралгидратным наркозом, извлекали желудки, рассекали по малой кривизне и промывали в изотоническом растворе натрия хлорида для удаления содержимого и оценивали степень влияния исследуемых веществ на слизистую оболочку. Степень повреждения желудка оценивали в баллах:
0 баллов – отсутствие повреждений,
1 балл – единичные незначительные повреждения (1 или 2 точечных кровоизлияния);
2 балла – множественные повреждения (эрозии, точечные кровоизлияния);
3 балла – значительные и множественные повреждения слизистой оболочки;
4 балла – грубые повреждения, охватывающие всю поверхность слизистой оболочки (массивные кровоизлияния, эрозии, перфорации) (таблица 2).
Статистически обработанные данные представлены в виде М±m, где М – выборочное среднее, т – ошибка среднего. Достоверность результатов оценивали параметрически по Т-критерию Стьюдента. Критический уровень значимости (р) при проверке статистических гипотез в данном исследовании принимали равным 0,05. Объем выборки n=6 в каждой группе животных. T-критерий Стьюдента – рассчитывали по формуле (3):
(3)
m = (наибольшее значение – M)*0,18.
Результаты исследования и их обсуждение
Исследование влияния измельченных побегов и коры ивы вавилонской и ее гибрида с ивой белой на развитие хронического пролиферативного воспаления на модели «ватной» гранулемы показало, что порошки, полученные из коры и побегов ивы вавилонской и ее гибрида с ивой белой достоверно уменьшили экссудацию по сравнению с контрольной группой на 39%; 40% и 35 %; 35% соответственно (таблица 1). Сравнение этого показателя в опытных группах с группой, получавших диклофенак (препарат сравнения), не выявило достоверных отличий, кроме группы, получавших порошок побегов гибрида (достоверное большее значение показателя экссудации на 7% по сравнению с диклофенаком). В целом порошки побегов и коры ивы вавилонской проявили большую антиэксудативную активность по сравнению с порошками коры и побегов гибрида, но это отличие не было достоверным.
Анализ влияния объектов исследования на пролиферативную стадию воспаления показал, что 3 исследуемых объекта (кора обоих видов ивы и побеги ивы вавилонской) достоверно угнетают образование грануляционной ткани по отношению к контрольной группе.
Результаты определения противовоспалительной активности порошков побегов и коры ивы вавилонской и гибрида в сравнении с диклофенаком
Источник