Диагностика вирусных заболеваний растений

3. Методы диагностики вирусных болезней растений

В основе диагностики вирусного заболевания лежат в первую очередь внешние симптомы. Внешними признаками при определении вирусного заболевания можно ограничиться в тех случаях, когда они очень четки и характерны только для данного вида заболевания.

Пример такой конверген­ции — хлороз плодовых деревьев или ягодных культур. Он может быть инфекционным, вызванным вирусами, и физиологическим, связанным с недостаточным поступлением в растение азота, же­леза, серы и т. д. Мозаичная расцветка листьев на огурце может быть следствием и вирусного поражения и дефицита марганца.

Применяют следующие методы диагностики вирусных заболе­ваний и вызывающих их вирусов:

1) установление инфекцион­ного заболевания;

2) метод растений-индикаторов;

4) электронная микроскопия;

6) метод люминесцентного анализа;

Основными из них являются первые четыре метода.

Для всех вирусов, которые удается передать соком на травя­нистые индикаторы, очень важный показатель при диагностике — определение физических свойств вируса по установлению трех констант:

1. температура инактивации вируса (предельно высокая тем­пература, при которой вирус инактивируется invitro в течение 10 мин);
2. границы разведения (степень предельного разведения сока больного растения, при которой еще сохраняется его инфекционность);
3. длительность сохранения инфекционного сока.

1. МИКОПЛАЗМЕННЫЕ ОРГАНИЗМЫ
2. ЦВЕТКОВЫЕ РАСТЕНИЯ
3. Повилики (Cuscuta)

Источник

Диагностика вирусных заболеваний растений

Опознать возбудителя заболевания — одна из первых задач на пути борьбы с вирусными болезнями. Самым быстрым, но и самым неточным методом является диагностика по внешнему виду. Однако разные вирусы могут вызвать одинаковые на первый взгляд поражения, поэтому такой способ может быть пригоден для предварительной оценки состояния растений.

Как вы могли заметить, название вируса включает термин, отражающий существенные признаки заболевания (вирус кольцевой пятнистости, желтухи, желтой мозаики и т. п.) и название растения, из которого этот вирус был впервые выделен. Однако то, что вирус включает в свое название определенное растение, не означает его исключительную активность по отношению к этому растению. Могут быть и другие виды и сорта растений, которые на заражение определенным вирусом реагируют определенными четкими симптомами. Именно такие растения выбирают ученые в качестве индикаторов. Обычно индикаторами служат табак, марь болотная, картофель и другие растения, способные реагировать на очень малое количество вирусов. Недостаток такого метода — растения-индикаторы необходимо держать в месте, защищенном от насекомых — переносчиков вирусов. Поэтому, если имеется достаточное количество вирусного препарата, фитопатологи применяют метод серологического анализа.

Допустим, что необходимо определить, каким вирусом поражено растение. Точнее, узнать, нет ли среди больных растений такого растения, которое было бы поражено тем же возбудителем, что и наше растение.

Как решать такую задачу? Ведь серологическая ,диагностика болезней основана на реакциях между антигенами и антителами. У нас же имеются соки с определенными вирусами растений и пораженное чем-то растение (из которого тоже можно выделить сок). Но как превратить сок растения в сыворотку с антителами? Где вырастить антитела, настроенные против находящегося в соке вируса антигена?

Если бы вирусоносителем было животное, а не растение, проблем вообще бы не возникло — организм животного сам выработал бы антитела. А что если ввести в организм животного сок растения, содержащий растительный вирус? Оказалось, что иммунизация животных соком растений дает такой же эффект, что и иммунизация другим антигеном, — выработку соответствующих антител.

Для иммунизации выбирают традиционных лабораторных животных: кроликов, мышей. Животному в вену, брюшную полость или под кожу вводят определенное количество сока, пораженного вирусом растения, и через несколько дней у такого животного берут кровь, приготавливают из нее сыворотку (точнее, антисыворотку, так как в ее составе появились антитела к неизвестному вирусу растения). Антисывороткой и соками разных растений, пораженных вирусными болезнями, заполняют лунки в чашке Петри. Образующиеся полосы преципитации доказывают родство возбудителей заболеваний.

Источник

Диагностика вирусных болезней растений

Диагностика вирусных болезней растений – это сочетаниеразличных этапов и приемов определения вида вируса, являющегося причиной изучаемого заболевания. Успешная борьба с вирозами невозможна без своевременного выявления заболевания и правильно идентификации вида вируса. Диапазон технологий, используемых для обнаружения и идентификации вирусов чрезвычайно широк. Современные методы диагностики являются усовершенствованными или модифицированными общепринятыми фитопатологическими методами, а также заимствуются из смежных областей науки (молекулярной биологии, биохимии, иммунологии). Разработка новых методов обнаружения и идентификации вирусов – постоянно развивающийся, активный процесс.

Основные методы диагностики вирозов

Диагностические приемы, используемые при идентификации вируса, во многом отличаются от приемов, применяемых при работе с патогенами грибной и бактериальной природы. Это объясняется морфологическими и биологическими особенностями вирусов: ультрамикроскопическими размерами, отсутствием способности к размножению на искусственных питательных средах, способность заражать растения разнообразных ботанических семейств, антигенная активность и прочее.

К основным методам диагностики фитовирусов относят:

• визуальный метод диагностики вирозов;
• установление инфекционность заболевания;
• иммунодиагностика вирозов, в том числе серологический метод иммунодиагностики вирозов и иммуноферментный анализ вирозов;
• методы молекулярно-биологической диагностики вирозов, в том числе метод молекулярной гибридизации, метод полимерной цепной реакции с обратной транскрипцией;
• метод растений-индикаторов;
• электронная микроскопия;
• анатомо-цитологический метод;
• метод включений.

Методы диагностики делят на прямые (электронная микроскопия, метод включений) и косвенные (метод растений-индикаторов, серологический, люминесцентный анализ).

Наиболее результативными в вирусологии являются: метод растений-индикаторов, метод электронной микроскопии, серологический, метод включений, установление инфекционности посредством переносчиков (для вирусов, не передающихся механическим путем).В последнее время широко используются молекулярно-генетические методы (полимеразная цепная реакция (ПРЦ).

Часто для более точной диагностики применяют комплекс методов.

Этапы диагностики

Диагностика основывается на данных об основных свойствах вируса и в определенной мере на наблюдении за развитием заболевания.

Для диагностики вирусных болезней растений предлагается использовать 10 этапов:

1. Определение вида зараженного растения.
2. Изучение симптомов заболевания.
3. Оценка распространенности заболевания, условий его развития и характера распределения.
4. Изучение инфекционности путем инокуляции сока, передача векторами, прививкой или повиликой.
5. Инокуляция или прививка серии растений-индикаторов с целью определения круга растений-хозяев вируса и его выделения.
6. Определение сохранения инфекционности сока после хранения, разведения и прогревания при различных температурах в течении 10 минут.
7. Исследования с помощью электронного микроскопа.
8. Серологическое тестирование.
9. Изоляция, очистка, определение физико-химических свойств, приготовление антисыворотки.
10. Инокуляция здоровых растений того же вида.

Интересна тема? Подпишитесь на персональные новости в ДЗЕН или Pulse или VK.Новости.

Источник

Диагностика вирусных болезней растений

Диагностика вирусных болезней растений – это сочетание различных этапов и приемов определения вида вируса, являющегося причиной изучаемого заболевания [1] .

Успешная борьба с вирозами невозможна без своевременного выявления заболевания и правильно идентификации вида вируса. Диапазон технологий, используемых для обнаружения и идентификации вирусов чрезвычайно широк. Современные методы диагностики являются усовершенствованными или модифицированными общепринятыми фитопатологическими методами, а также заимствуются из смежных областей науки (молекулярной биологии, биохимии, иммунологии). Разработка новых методов обнаружения и идентификации вирусов – постоянно развивающийся, активный процесс [3] .

Первый этап диагностики – определение вида растения.

Основные методы диагностики вирозов

Диагностические приемы, используемые при идентификации вируса, во многом отличаются от приемов, применяемых при работе с патогенами грибной и бактериальной природы. Это объясняется морфологическими и биологическими особенностями вирусов: ультрамикроскопическими размерами, отсутствием способности к размножению на искусственных питательных средах, способность заражать растения разнообразных ботанических семейств, антигенная активность и прочее [1] .

К основным методам диагностики фитовирусов относят:

• визуальный метод диагностики вирозов;
• установление инфекционность заболевания;
• иммунодиагностика вирозов, в том числе серологический метод иммунодиагностики вирозов и иммуноферментный анализ вирозов;
• методы молекулярно-биологической диагностики вирозов, в том числе метод молекулярной гибридизации, метод полимерной цепной реакции с обратной транскрипцией;
• метод растений-индикаторов;
• электронная микроскопия;
• анатомо-цитологический метод;
• метод включений[2][1] .

Методы диагностики делят на прямые (электронная микроскопия, метод включений) и косвенные (метод растений-индикаторов, серологический, люминесцентный анализ) [1] .

Наиболее результативными в вирусологии являются: метод растений-индикаторов, метод электронной микроскопии, серологический, метод включений, установление инфекционности посредством переносчиков (для вирусов, не передающихся механическим путем). В последнее время широко используются молекулярно-генетические методы (полимеразная цепная реакция (ПРЦ) [1] .

Часто для более точной диагностики применяют комплекс методов [1] .

Этапы диагностики

Диагностика основывается на данных об основных свойствах вируса и в определенной мере на наблюдении за развитием заболевания [1] .

Для диагностики вирусных болезней растений предлагается использовать 10 этапов:

1. Определение вида зараженного растения [1] .
2. Изучение симптомов заболевания [1] .
3. Оценка распространенности заболевания, условий его развития и характера распределения [1] .
4. Изучение инфекционности путем инокуляции сока, передача векторами, прививкой или повиликой [1] .
5. Инокуляция или прививка серии растений-индикаторов с целью определения круга растений-хозяев вируса и его выделения [1] .
6. Определение сохранения инфекционности сока после хранения, разведения и прогревания при различных температурах в течении 10 минут [1] .
7. Исследования с помощью электронного микроскопа [1] .
8. Серологическое тестирование [1] .
9. Изоляция, очистка, определение физико-химических свойств, приготовление антисыворотки[1] .
10. Инокуляция здоровых растений того же вида[1] .

Источник